Экстрагирование.Выделение флавоноидов.
2023.12.13
https://medical-diss.com/
Выделение флавоноидов. В результате поисковых работ были обнаружены вещества флавоноидной природы, предварительно отнесенных к классам: хадконов, флаванонов, флавонов и флаванолов» Флавоноиды извлекали из измельченного растительного материала концентрированными и водными спиртами. Извлечения концентрировали, очищали и фракционировали с применением хроматографии на порошках целлюлозы, полиамида и силикагеле. Качественный состав суммарных извлечений и отдельных фракций анализировали хроматографией на бумаге с применением ряда диагностических реактивов.
Для анализа использовали суммарные флавоноидные биологически активные комплексы, способы получения которых защищены авторскими свидетельствами. Так из отходов мяты перечной, после получения настойки, разработан способ получения флавоноидов, обладающих желчегонным действием /5, 55/. С целью утилизации отходы мяты перечной после производства настойки на этаноле, промывали водой в пе-рколяторе до полдаго удаления водного спирта, затем для полного удаления воды промывали метанолом, а для удаления метанола сырье
в перколяторе промывали хлороформом, после чего сырье перегружали в экстрактор, заливали хлороформом и нагревали на водяной бане. Хлороформные вытяжки отфильтровали, контролируя их хроматографией на бумага. Очищенное сырье экстрагировали сухим метанолом до отрицательной цианидиновой реакции. Метанолькые извлечения концентрировали при нагревании под вакуумом, а выпавший мелкокристаллический продукт отфильтровывали и промывали диэтиловым эфиром. Выход -1,21+0,3$.
Для расширения сырьевой базы и увеличения выхода целевого продукта измельченную воздушно-сухую траву мяты водяной /б/ вначале обрабатывали несколько раз хлороформом при температуре 40~50°С до бесцветных порций хлороформных вытяжек, что позволяло удалить из сырья смолы, жиры, хлорофилл, фитостерины, пектиновые и другие вещества, затрудняющие кристаллизацию целевого продукта. При 40-50°С флавоноидные гликозиды в хлороформ не переходяг, что подтверждается хроматографией на бумаге. Затем сырье подвергали экстракции метанолом на кипящей водяной бане до отрицательной цианидиновой реакции. Метанол не содержит воды (в отличие от 96° этанола), что позволяет более полно выделить флавоноидные соединения практически без неорганических примесей. Метанольный экстракт концентрировали под вакуумом до образования белого мелкокристаллического осадка. При этом, образование мелкокристаллического осадка ускоряется из-за отсутствия нежелаемых примесей, удаленных раннее хлороформом. Увеличение выхода конечного продукта достигается за счет использования травы мяты водяной, а также за счет предварительной очистки сырья хлороформом и использования в качестве экстрагента практически "сухого" спирта - метанола. Кристаллический осадок отфильтровывают и обрабатывают диэтиловш эфиром для удаления метанола и возможных следов хлорофилла и др. примесей. Выход суммы флавоноидов 2,4^+0,21,
Сумму флавонов многократно экстрагировали из травы шлемника обыкновенного 96° этанолом /3, 65/. Каждый раз упаривая вытяжку до одной трети с последующим добавлением очередной порции извлечения в одну и ту же посуду для ускорения осаждения. Выпавший мелкокристаллический осадок отфильтровывали и пропивали диэтиловым эфиром. Выход - 3,8^+0,8^2.
Согласно разработанному способу получения флавонов /13/ надземную часть белокудренника черного многократно подвергали экстракции 96,?'~ным этиловым спиртом. При этом, в экстракт переходили
флавоны, другие пигменты, смолы, хлорофилл и неорганические веще» ства, которые выпадали в осадок. Осадок промывали диэтиловым эфиром, который увлекал другие пигменты, смолы и хлорофилл. Очищенным диэтиловым эфиром осадок.растворяли в горячей дистиллированной воде, добавляли 9б£-ный этанол, который вытесняет из раствора неорганические вещества, охлаждали, выпавший белый осадок отфильтровывали, а фльтрат упаривали до небольшого объема, кристаллизовали и отфильтровывали целевой продукт. Выход - 1,9£+0,1#.
Согласно разработанному способу получения суммы флавоноидов, иридоидов и оксикоричных кислот /II, 67/ надземную часть зопника клубненосного экстрагировали 70>&-ным этанолом, концентрировали, добавляли воду, отгоняли остаток спирта. Полученный водный раствор охлаждали до комнатной температуры и помещали на сутки в холодильник. Выпавший осадок отфильтровывали и растворяли при нагревании в 70$-ном этаноле, охлаждали и спиртовый раствор помещали в холодильник на сутки. Выпавший осадок опять отфильтровывали и вновь растворяли при нагревании в 70#-ном этаноле. Эту операцию проводят до тех пор, пока очередной раствор не будет давать качественные реакции на флавоноиды, оксикоричные кислоты и иридоиды, а спиртовые фильтраты объединяли, упаривали, остаток растворяли в горячей воде и полученный раствор объединяли с полученным в сомом начале водным раствором, охлавдали до комнатной температуры и хроматогра-фировали на колонке, заполненной капроном, прочно задерживающим в своих верхних слоях дубильные вещества, хлорофилл и другие примеси, производили элюирование водой. В фильтрованном УФ-свете отмечали на колонке лаково-краснув зону и удаляли ее, а оставшийся столб сорбента промывали 70^-ным спиртом до отрицательных качественных реакций на флавоноиды, оксикоричные кислоты и иридоиды. Водные элюаты объединяли со спиртовыми, при нагревании под вакуумом отгоняли спирт, а водный раствор сушили в распылительной сушилке и получали 8,12/6+0,05| целевого продукта.
По способу получения кверцетина /8/ отходы травы зверобоя обыкновенного после получения настойки зверобоя путем перколяции
водным раствором этанола экстрагировали 95-96/5 этанолом в соотношении 1:10 - 1:12 в системе с обратным холодильником на кипящей водяной бане, процесс повторяли до отрицательной цианилиновой реакции. Проведение экстракции при нагревании ускоряло процесс извлечения кверцетина. После чего извлечения отфильтровывали, упаривали досуха известными способами, а сухой остаток пере-
кристаллизовывали дважды из 60-70$ этанола, содержащего 1-2$ серной кислоты при температуре 30-35°С, промывали дистиллированной водой до нейтральной реакции по лакмусу и получали конечный продукт в виде мелкокристаллического желтого порошка. Кверцетин начинает кристаллизоваться уже при температуре 35°С, при температуре ниже 30°С наблюдается выпадение в осадок хлопьевидных антра-ценпроизводных веществ. При этом улучшаются условия кристаллизации кверцетина, так как он, как полифенольное соединение, обладает слабовыраженной кислотностью и уже при первой кристаллизации вытесняется из растворов более сильной серной кислотой. Выход конечного продукта составляет 1,1%+0,1% в пересчете на воздушно-сухое сырье.
•Из мяты водяной, мяты курчавой, мяты перечной и отходов мяты перечной после получения настойки и эфирного масла выделено одно вещество халконовой природы, раствор которого при сильном нагревании на кипящей водяной бане давал положительную цианиди-новую реакцию, 2 флаванона, 6 флавонов.
Из растений рода зопник - 5 веществ флавоновой природы. В результате исследований рода Белокудренник выделено 3 флавока. Из растений рода шлемник изолировано 6 флавонов, панцерии - 6, из адониса волжского - 5 флавоновых соединений, из шалфея поникающего - 2 флавона, из живучки Лаксмана - 2 флазона.
